腹腔注射（Intraperitoneal Injection, IP）是小鼠實驗中常見的給藥方式，適用于藥物、細(xì)胞懸液或試劑遞送。然而，操作不當(dāng)可能導(dǎo)致注射失敗、組織損傷甚至小鼠死亡。本文瀚江生物將詳細(xì)介紹小鼠腹腔注射的實驗要點，幫助大家規(guī)范操作，提高實驗成功率~
一、為什么選擇腹腔注射？
吸收快：腹腔內(nèi)血管豐富，藥物可快速吸收進(jìn)入血液循環(huán)。
操作簡便：相比靜脈注射（IV）或尾靜脈注射，IP技術(shù)要求較低。
適用性廣：適合大體積（5-10 mL/kg）或刺激性較小的藥物。
局限性： 不適合強酸、強堿或高滲溶液（可能引發(fā)腹膜炎）。 吸收速度略慢于靜脈注射。
二、實驗前的準(zhǔn)備工作
1. 器材準(zhǔn)備
注射器：1 mL 或更?。ň_控制劑量）
針頭：25-27G（細(xì)針減少損傷），長度約1.5 cm（避免刺入過深）
消毒用品：75%酒精棉球或碘伏
小鼠：提前適應(yīng)環(huán)境，避免應(yīng)激；如需空腹，可禁食4-6小時（減少胃腸內(nèi)容物）
2. 藥物配制 確保無菌、無顆粒（可過濾）。
注射體積：5-10 mL/kg 體重（如20 g小鼠注射0.1-0.2 mL）。 刺激性藥物需調(diào)整pH或稀釋，避免腹腔刺激。
三、腹腔注射操作步驟
1. 小鼠固定
手法：左手拇指和食指捏住小鼠頸背部皮膚，小指或無名指固定尾部，使其腹部朝上，頭部略向下傾斜（使腸道自然上移，減少刺傷風(fēng)險）。
注意：若小鼠掙扎劇烈，可用布巾包裹或短暫麻醉（如異氟烷）。
2. 注射定位
最佳進(jìn)針區(qū)域：小鼠下腹部 左下或右下1/3處（避開中線血管和膀胱）。
? 避免中線（易刺傷血管或膀胱）。
? 避免右上腹（靠近肝臟）。
3. 注射操作
消毒：酒精棉球擦拭注射部位。
進(jìn)針： 針頭以 30-45°角 刺入皮膚，進(jìn)入腹腔時有明顯“落空感”（約3-5 mm深）。
回抽：確認(rèn)無血液、尿液或腸內(nèi)容物（如有，需更換位置）。
推注：緩慢注射（0.1 mL/秒），避免壓力過大。
拔針：快速拔出，輕壓片刻防止?jié)B漏。
四、常見問題及解決方案
1. 藥物漏出
原因：針頭未完全進(jìn)入腹腔或拔針過快。
解決：重新消毒，更換注射部位。
2. 注射后小鼠死亡
可能原因： 誤入血管（回抽未檢查）。 刺傷內(nèi)臟（如腸道、肝臟）。 藥物毒性或劑量錯誤。
3. 腹膜炎或炎癥反應(yīng)
預(yù)防： 確保藥物無菌、無刺激性。 避免重復(fù)同一部位注射（間隔48小時以上）。
五、實驗小技巧
?? 新手練習(xí)：可先用生理鹽水或染色液練習(xí)，觀察注射后腹腔分布情況。
?? 標(biāo)記注射位點：避免同一小鼠短期內(nèi)重復(fù)注射同一區(qū)域。
?? 術(shù)后觀察：檢查小鼠是否出現(xiàn)疼痛（弓背、活動減少）、腹脹或異常行為。
六、倫理與規(guī)范
操作需符合動物實驗倫理，減少小鼠痛苦。
如實驗需多次注射，應(yīng)評估小鼠狀態(tài)，必要時使用鎮(zhèn)痛措施。
總結(jié) 小鼠腹腔注射是基礎(chǔ)但關(guān)鍵的實驗技術(shù)，掌握正確的進(jìn)針位置、角度和注射手法可大幅提高成功率。
建議新手先在麻醉小鼠或模型上練習(xí)，熟練后再進(jìn)行正式實驗。
