動物選擇
選用雄性SD或Wistar大鼠(避免雌激素干擾),體重200-250g,SPF級。
預(yù)先適應(yīng)性飼養(yǎng)1周,維持室溫(22±2℃)、12h光暗周期。
寒凝血瘀證造模
寒冷刺激:將大鼠置于低溫環(huán)境(4±1℃),每日2-4小時,持續(xù)14-21天(避免凍傷)。
苯甲酸雌二醇注射: 劑量:0.5-1 mg/kg(腹腔或皮下注射,隔日1次)。
作用:誘導(dǎo)血液高凝狀態(tài),模擬血瘀。
縮宮素注射: 劑量:2-5 IU/kg(腹腔注射,每日1次)。
作用:通過血管收縮加劇微循環(huán)障礙,協(xié)同寒冷刺激。
行為學(xué)驗證
PD癥狀:旋轉(zhuǎn)行為(阿撲嗎啡誘導(dǎo))、步態(tài)分析(步幅縮短、運(yùn)動遲緩)。
血瘀證指標(biāo):尾靜脈血流速度(激光多普勒)、血液流變學(xué)(全血黏度、血小板聚集率)。
終點(diǎn)檢測
病理學(xué):黑質(zhì)TH神經(jīng)元染色(PD標(biāo)志)、微血栓(HE染色)、內(nèi)臟器官(肝、腎)淤血。
生化指標(biāo):血漿ET-1(內(nèi)皮素-1)、TXB2(血栓素B2)升高,6-keto-PGF1α降低。
中醫(yī)證候:舌質(zhì)紫暗(舌黏膜顯微觀察)、爪甲/尾部瘀斑