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成功案例
發(fā)布日期:2024/11/5 17:05:00

實(shí)驗(yàn)背景

抑郁癥是一種情感性精神障礙疾病,其主要特征為持續(xù)的情緒低落、興趣喪失及快感缺乏。患者往往伴隨有認(rèn)知功能損害、睡眠障礙、食欲減退等癥狀,嚴(yán)重影響其日常工作和生活質(zhì)量。抑郁癥不僅對(duì)患者自身造成極大痛苦,還給家庭和社會(huì)帶來(lái)沉重負(fù)擔(dān)。

 

實(shí)驗(yàn)原理

CSDS模型的核心原理是通過(guò)讓受試動(dòng)物(通常是嚙齒類(lèi)動(dòng)物,如小鼠或大鼠)經(jīng)歷反復(fù)的社交挫敗應(yīng)激,從而誘發(fā)其出現(xiàn)抑郁樣行為。具體來(lái)說(shuō),這一過(guò)程涉及將一只受試動(dòng)物與一只具有攻擊性的動(dòng)物(通常是經(jīng)過(guò)篩選的雄性小鼠或大鼠)放置在同一環(huán)境中。具有攻擊性的動(dòng)物會(huì)反復(fù)、強(qiáng)勢(shì)地攻擊受試動(dòng)物,導(dǎo)致后者經(jīng)歷持續(xù)的社交挫敗。


這個(gè)對(duì)抗的過(guò)程是持續(xù)發(fā)生的,小鼠會(huì)在這個(gè)過(guò)程中不斷地被擊敗。這種持續(xù)的社交壓力和挫敗會(huì)導(dǎo)致被擊敗的小鼠出現(xiàn)一系列心理和行為上的改變,類(lèi)似于人類(lèi)抑郁癥的癥狀。這些改變包括社交退縮、興趣減退、厭食、睡眠紊亂和學(xué)習(xí)記憶障礙等。

 

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選擇

CD-1小鼠,6周齡;C57BL/6J小鼠,雄性,6周齡

 

實(shí)驗(yàn)試劑及儀器設(shè)備

含隔離擋板的大鼠飼養(yǎng)籠、強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)、懸尾實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)

 

實(shí)驗(yàn)分組

CD-1小鼠:作為攻擊源,單籠飼養(yǎng)7天以產(chǎn)生領(lǐng)地意識(shí)

C57BL/6小鼠:兩組,實(shí)驗(yàn)組(Sus)和非應(yīng)激對(duì)照組(Con)

 

造模方法

1.攻擊性篩選階段(3days)

將C57BL/6小鼠放入CD-1小鼠籠中3分鐘。

若CD-1小鼠攻擊次數(shù)多于5次且攻擊潛伏期<1分鐘,則認(rèn)為CD-1小鼠具有攻擊性。

在3天內(nèi)至少2次表現(xiàn)出攻擊性的CD-1小鼠被選為攻擊鼠。

2.CSDS階段(10days)

實(shí)驗(yàn)組(Sus)C57BL/6小鼠連續(xù)10天放入具有攻擊性的CD-1小鼠籠中,被攻擊5~10分鐘后用帶孔透明亞克力板隔離24小時(shí)。每天更換新的CD-1小鼠以避免適應(yīng)。

非應(yīng)激對(duì)照組(Con)C57BL/6小鼠每天與無(wú)攻擊性的C57BL/6小鼠接觸5~10分鐘后,同樣用帶孔透明亞克力板隔離24小時(shí),每天更換不同的實(shí)驗(yàn)籠,重復(fù)操作10天。

3.社交檢測(cè)階段

10天后,將實(shí)驗(yàn)組和非應(yīng)激對(duì)照組的C57BL/6小鼠取出并單籠飼養(yǎng),以便后續(xù)觀察和分析。

(1)強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)裝置中加2L清水,水溫在(22±1)℃,2只動(dòng)物之間應(yīng)更換清水。實(shí)驗(yàn)第 1 天將小鼠置燒杯中,游泳15 min 后取出擦干。第 2 天將小鼠置燒杯中,計(jì)時(shí)6 min,記錄后4 min的不動(dòng)時(shí)間。

(2)懸尾實(shí)驗(yàn)

將小鼠尾部 3 cm處固定,并懸掛于實(shí)驗(yàn)裝置上方,距離地面30~40 cm處,計(jì)時(shí) 6 min,通過(guò)軟件觀察并記錄后4 min的不動(dòng)時(shí)間。

 

CSDS導(dǎo)致小鼠抑郁行為

通過(guò)對(duì) CSDS模型小鼠進(jìn)行抑郁樣行為學(xué)分析評(píng)價(jià)發(fā)現(xiàn),敏感組小鼠(n=21)與非應(yīng)激對(duì)照組小鼠 (n=18)相比,在強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)和懸尾實(shí)驗(yàn)中,CSDS 敏感組小鼠在后 4 min 的不動(dòng)時(shí)間明顯增加(P=0.004,P=0.0078),表現(xiàn)出放棄掙扎,行為絕望,該法誘導(dǎo)的應(yīng)激敏感組小鼠模型可穩(wěn)定地模擬出抑郁癥患者經(jīng)典行為學(xué)改變。

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