觀察嚙齒類動(dòng)物的焦慮狀態(tài)通常依賴于物種特定的行為，如增加風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估、減少探索、尋求庇護(hù)、逃跑、掩埋或排便。在嚙齒類動(dòng)物中最常用的行為測試之一是曠場實(shí)驗(yàn)（Open Field Test，OFT），或稱敞箱實(shí)驗(yàn)，是常用的研究動(dòng)物自發(fā)活動(dòng)、探索行為和焦慮、抑郁狀態(tài)的經(jīng)典行為學(xué)實(shí)驗(yàn)。該行為范式應(yīng)用歷史悠久，是由Calvin Hall于1934年設(shè)計(jì)發(fā)明的，最初應(yīng)用于研究大鼠的情緒變化（記錄排便評(píng)分），后推廣到小鼠及其他動(dòng)物上。如今，由于可以使用自動(dòng)跟蹤軟件分析中央?yún)^(qū)活動(dòng)時(shí)間作為焦慮的評(píng)價(jià)指標(biāo)，這使曠場實(shí)驗(yàn)成為最廣泛使用的焦慮測試。該模型的設(shè)計(jì)原理是基于嚙齒動(dòng)物面對(duì)新異環(huán)境會(huì)產(chǎn)生好奇心而去主動(dòng)探索，但另一方面，它們又存在因恐懼回避明亮開闊、未知、可能有潛在危險(xiǎn)的場所的天性,其活動(dòng)具有趨觸性(thigmotaxis) ，即動(dòng)物在探索開放空間時(shí)“貼墻”活動(dòng)的趨向性。利用這種探索動(dòng)機(jī)和恐懼回避的矛盾沖突心理，在造成動(dòng)物焦慮情緒的同時(shí)， 不僅可以評(píng)估實(shí)驗(yàn)操作對(duì)焦慮樣行為的特定影響，還可以研究非特異性影響，特別是對(duì)一般活動(dòng)的影響。
儀器介紹
1. 儀器名稱：大小鼠曠場實(shí)驗(yàn)行為分析系統(tǒng)。
2. 硬件系統(tǒng)：曠場實(shí)驗(yàn)箱、攝像機(jī)、實(shí)驗(yàn)專用電腦。
3. 軟件系統(tǒng)：如TopScan Light?，VisuTrack等軟件。包括實(shí)驗(yàn)設(shè)置，圖像采集與分析，數(shù)據(jù)顯示與導(dǎo)出等功能。
實(shí)驗(yàn)程序
目前各項(xiàng)研究中應(yīng)用曠場實(shí)驗(yàn)的一般程序基本一致，但具體細(xì)節(jié)不盡相同。
基本程序如下：
1. 大/小鼠在購入后進(jìn)行7天或以上的適應(yīng)性喂養(yǎng)，實(shí)驗(yàn)人員可每天撫摩動(dòng)物一定時(shí)間，使其適應(yīng)環(huán)境和光暗周期以及熟悉研究人員。
2. 在實(shí)驗(yàn)的當(dāng)天早上，稱重并記錄實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的體重。
3. 在測試前一小時(shí)提前將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物轉(zhuǎn)運(yùn)至測試室，以適應(yīng)該房間，避免新環(huán)境引起動(dòng)物的應(yīng)激和壓力。
4. 將攝像機(jī)調(diào)試好高度，確保在電腦屏幕上能看到箱體的所有區(qū)域。
5. 實(shí)驗(yàn)者調(diào)試好實(shí)驗(yàn)參數(shù)，在操作軟件中記錄實(shí)驗(yàn)日期、動(dòng)物的分組及編號(hào)等信息。
6. 在測試前，通過噴灑75 %的酒精并用紙巾擦拭干凈，確保實(shí)驗(yàn)箱清潔無味。
7. 實(shí)驗(yàn)時(shí)握住大/小鼠尾巴根部 1/3 處將其從飼養(yǎng)籠中取出，注意背向?qū)嶒?yàn)人員，避免暴力操作等造成動(dòng)物應(yīng)激的因素。
8. 將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物迅速輕柔地放置到實(shí)驗(yàn)箱的中央?yún)^(qū)域，同時(shí)啟動(dòng)視頻采集與分析系統(tǒng)，自動(dòng)記錄實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在曠場中的活動(dòng)情況。
9. 實(shí)驗(yàn)者立即站到1.5 m外觀測，或離開行為測試室到另外一個(gè)可以觀測到動(dòng)物的房間。同樣，這應(yīng)該有助于減少對(duì)動(dòng)物的壓力，并盡量減少潛在的外部影響。
10. 通常設(shè)置實(shí)驗(yàn)時(shí)間為15 min。
11. 實(shí)驗(yàn)結(jié)束后停止并保存錄像，將動(dòng)物從實(shí)驗(yàn)箱中取出，然后放回飼養(yǎng)籠中。
12. 每次測試結(jié)束后，需要清除掉上一只動(dòng)物的排泄物，并用75 %的酒精去除氣味，待箱體干燥無味后再進(jìn)行下一只動(dòng)物的實(shí)驗(yàn)。
13. 導(dǎo)出數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
資料來源參考：腦聲常談
